二、將需滅菌的培養(yǎng)基、蒸餾水或其它器皿放入滅菌鍋內(nèi)，關(guān)閉鍋蓋，檢查排氣閥、安全閥狀態(tài)， 三、打開(kāi)電源，檢查參數(shù)設(shè)置是否正確，然后按下“work”鍵，滅菌鍋開(kāi)始工作；自動(dòng)派冷氣，到105℃時(shí)，底部排氣閥門(mén)自動(dòng)關(guān)閉，然后壓力開(kāi)始上升；  

四、壓力升至 0.15MPa（121℃）時(shí)，滅菌鍋再次自動(dòng)放氣，然后開(kāi)始記時(shí)，一般培養(yǎng)基滅菌20min，蒸餾水滅菌30min；  

五、達(dá)到規(guī)定的滅菌時(shí)間后，關(guān)閉電源，打開(kāi)放氣閥緩慢放氣；當(dāng)壓力指針降至 0.00MPa時(shí)，放氣閥無(wú)蒸汽排除時(shí)，方可開(kāi)啟鍋蓋。  

六、注意事項(xiàng)  1、汽未放盡前，不得開(kāi)啟高壓鍋；  2、如果滅菌后的培養(yǎng)基在鍋內(nèi)不及時(shí)拿出，需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開(kāi)，切忌將培養(yǎng)基封閉在鍋內(nèi)過(guò)夜。  3、壓力表指針在0.05MPa以上時(shí)，不能過(guò)快放汽，以防止壓力急速下降，液體滾沸，從培養(yǎng)容器中溢出。 4、操作過(guò)程，請(qǐng)注意安全，小心燙傷。

高溫滅菌鍋的使用方法

1．首先將內(nèi)層滅菌桶取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。  

2．放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。  

3．加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對(duì)稱(chēng)的方式同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。  

4．用電爐或煤氣加熱，并同時(shí)打開(kāi)排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣*排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時(shí)，控制熱源，維持壓力至所需時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)用 1．05kg/cm2，121．3℃，20分鐘滅菌。  

5．滅菌所需時(shí)間到后，切斷電源或關(guān)閉煤氣，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降至0時(shí)，打開(kāi)排氣閥，旋松螺栓，打開(kāi)蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時(shí)，打開(kāi)排氣閥，就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。

6．將取出的滅菌培養(yǎng)基放入 37℃溫箱培養(yǎng)24小時(shí)，經(jīng)檢查若無(wú)雜菌生長(zhǎng)，即可待用。 不過(guò)有幾點(diǎn)要注意的： 1.鍋內(nèi)必須要有充足的水。 2.鍋的氣密性一定要很好。 3.使用完后一定要放到適合溫度才可以打開(kāi)。